WWW.EL.Z-PDF.RU
БИБЛИОТЕКА  БЕСПЛАТНЫХ  МАТЕРИАЛОВ - Онлайн документы
 

«ОТБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ Выявление ДНК аденовирусов плотоядных первого типа, вызывающих гепатит плотоядных, и аденовирусов плотоядных второго типа, вызывающих аденовироз собак, ...»

Тест-система «АДЕНОВИР»

Тест-система «АДЕНОВИР» (test-system «ADENOVIR») для выявления и дифференциации ДНК аденовируса плотоядных первого типа (Canine adenovirus I), вызывающего гепатит плотоядных, и аденовируса плотоядных второго типа (Canine adenovirus II), вызывающего аденовироз собак, в биологическом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

ОТБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

Выявление ДНК аденовирусов плотоядных первого типа, вызывающих гепатит плотоядных, и аденовирусов плотоядных второго типа, вызывающих аденовироз собак, в смывах с конъюнктивы (в первую неделю после появления конъюнктивита), выделениях из носа (в первую неделю после их появления),фекалиях (при наличии расстройства ЖКТ) и сыворотке крови (при подозрении на гепатит собак).

При отборе образцов материала, а также при подготовке проб для исследования необходимо соблюдать меры, предупреждающие обсеменение объектов внешней среды, руководствуясь при этом действующими правилами и инструкциями.

Материал от каждого животного отбирают отдельными инструментами.

Для взятия материала со слизистой конъюнктивы и носовой полости рекомендуется использовать стерильные зонды с ватными тампонами и стерильные пробирки объемом 1,5 мл, содержащие 300 мкл стерильного физиологического раствора. Зонд смочить в жидкости и отжать влагу, прислоняя ватный наконечник к внутренней стенке пробирки. Оттянув веко животного, провести зондом по слизистой века по направлению к носу, обмывая глазное яблоко. Тщательно прополоскать зонд в пробирке и аккуратно отжать лишнюю влагу, прижимая наконечник к внутренней стенке пробирки. Процедуру повторить с каждым веком обоих глаз, собирая материал в одну и ту же пробирку. От зонда отломить часть с ватным наконечником и поместить его в ту же пробирку, плотно закрыв крышку. Аналогично проводится получение смывов со слизистой носа.

Фекалии животных при наличии диареи собирают в стерильный пластиковый контейнер в количестве 5 - 20 г.

Для получения сыворотки проводят забор крови в пробирку без антикоагулянта. Пробирки с кровью отстаивают при комнатной температуре в течение 30 мин. до полного образования сгустка. Затем центрифугируют при 800-1600 g в течение 10 минут при комнатной температуре. Переносят сыворотку в количестве не менее 300 мкл отдельными наконечниками с аэрозольным барьером в стерильные пробирки объемом 1,5 мл.

Материалы доставляют в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя при температуре от 2 до 8 °С. Допускается хранение материала при температуре не выше минус 16 °С в течение 30 дней.

Тест система «КАЛИЦИВИР»

Тест система «КАЛИЦИВИР» для выявления к ДНК Feline calicivirus методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

ОТБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

Диагностики возбудителя калицивироза кошек путем выявления РНК вируса Feline calicivirus в конъюнктивальных и носоглоточных смывах и соскобов из язв ротовой полости методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

При отборе образцов материала, а также при подготовке проб для исследования необходимо соблюдать меры, предупреждающие заражение людей и обсеменение объектов внешней среды. Материал от каждого животного отбирают отдельными инструментами.

Для исследования используют следующий клинический материал:

- соскобы из язв ротовой полости;

- смывы со слизистой конъюнктивы глаз;

- смывы со слизистой носа и ротоглотки.

Для приготовления соскобов из язв ротовой полости, смывов с конъюнктивы, слизистой носа и ротоглотки животных рекомендуется использовать стерильные зонды с ватными тампонами и стерильные пробирки объемом 1,5 мл, содержащие 300 мкл стерильного физиологического раствора. При необходимости вместо зондов и пробирок с физраствором можно использовать подручные средства: спичку с предварительно срезанной с нее серной головкой, с одного конца обмотанную кусочком ваты размером с горошину, и чистые флаконы с пробкой типа пенициллиновых, наполненные свежей холодной кипяченой водой до уровня 0,5 см от дна флакона. Методика получения смывов:

а. зонд смочить в жидкости и отжать влагу, прислоняя ватный наконечник к внутренней стенке пробирки.

б. оттянув веко животного, провести зондом по слизистые века по направлению к носу, обмывая глазное яблоко.

в. тщательно прополоскать зонд в пробирке.

г. провести процедуры а. – в. последовательно с каждым веком обоих глаз, собирая материал в одну и ту же пробирку.

д. от зонда отломить часть с ватным наконечником (палочка должна быть полностью погружена в пробирку) и поместить его в ту же пробирку, плотно закрыв крышку.

Аналогично проводится получение смывов со слизистой ротоглотки.

Материал доставляют в лабораторию в день взятия, сохраняя при температуре от 2 до 8°С. При необходимости хранения материал замораживать при температуре не выше -16°С. Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала.

Тест-система «КОРОНАВИР»

Тест-система «КОРОНАВИР» для диагностики инфекционного перитонита кошек и коронавирусного энтерита собак путем выявления РНК коронавируса в плазме крови, асцитной жидкости и фекалиях методом полимеразной цепной реакции (ПЦР)

ОТБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

Диагностика инфекционного перитонита кошек и коронавирусного энтерита собак путем выявления РНК коронавируса в плазме крови, асцитной жидкости и фекалиях методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Обнаружение коронавирусов в фекалиях кошек свидетельствует о носительстве коронавирусов в кишечнике этих животных.

При отборе образцов материала, а также при подготовке проб для исследования необходимо соблюдать меры, предупреждающие заражение людей и обсеменение объектов внешней среды. Материал от каждого животного отбирают отдельными инструментами.

Для исследования на инфекционный перитонит кошек используют следующий клинический материал:

- плазма крови в объеме не менее 300 - 500 мкл;

- асцитная жидкость в объеме не менее 300 - 500 мкл.

Для исследования на энтерит у собак и носительство коронавирусов используют следующий клинический материал:

- фекалии 5-10 г отбирают в стерильные контейнеры.

Материал доставляют в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя при температуре от 2 до 8°С.

«МИК-КОМ»

Тест-система «МИК-КОМ» для выявления ДНК микроорганизмов рода Mycoplasma в биологическом материале от животных, больной и павшей птицы, эмбрионах, а также культурах клеток и сыворотках (обнаружение контаминантов) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

ОТБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

Тест-система предназначена для выявления ДНК микроорганизмов рода Mycoplasma в биологическом материале от животных, больной и павшей птицы, эмбрионах, а также культурах клеток и сыворотках (обнаружение контаминантов) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

При отборе образцов материала, а также при подготовке проб для исследования необходимо соблюдать меры, предупреждающие обсеменение объектов внешней среды, руководствуясь при этом действующими правилами и инструкциями.

Материал от каждого животного отбирают отдельными инструментами.

Для исследования используют:

- назальные, конъюнктивальные смывы, истечения,

- синовиальная жидкость суставов,

- желток, аллантоисную жидкость эмбрионов,

- паренхиматозные органы, трахею, воздухоносные мешки павшей птицы,

- цельную кровь,

- сыворотки (лечебные), культуры клеток (оптимальная концентрация 106клеток в мл),

- сперма в объеме не менее 2 мл.

Кровь забирают в пробирку с 6% ЭДТА из расчета 20:1.

Из тканей и органов вырезают кусочки размером 1х1х1 см (при невозможности толщина кусочков может быть меньше).

Материалы доставляют в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя при температуре от 2°С до 8 °С. Допускается хранение материала при температуре не выше минус 16 °С в течение 30 дней.

Пробы цельной крови, консервированной трилоном Б (ЭДТА), лечебные сыворотки и культуры клеток используют для экстракции ДНК без предварительной подготовки.

Пробы исследуемых жидкостей, кроме крови, в объеме 1,5 мл (при необходимости объем проб доводят до требуемого путем добавления физиологического раствора) центрифугируют при 10 тыс об/мин в течение 5 мин. Супернатант осторожно отбирают, оставив над осадком примерно 0,2 мл жидкости. Если осадок практически не виден, то в эту же пробирку вносят еще 1,5 мл материала и повторяют центрифугирование. Осадок суспендируют в оставшейся надосадочной жидкости переносят в пробирку типа “Эппендорф” и 100 мкл суспензии используют для экстракции ДНК.

Кусочки паренхиматозных органов, трахеи, воздухоносных мешков размером 1х1х1 см тщательно растирают в отдельных стеклянных гомогенизаторах, фарфоровых ступках и т.п., добавляют по 1 мл (т.е. примерно равный объем) физиологического раствора и тщательно перемешивают. Смесь отстаивают при комнатной температуре в течение 30 мин, после чего верхнюю фазу переносят в пробирки типа «Эппендорф» и 100 мкл ее используют для экстракции ДНК.

«ПАРВОВИР»

Тест-система «ПАРВОВИР» для выявления ДНК парвовирусов (Canineparvovirus, Felinepanleukopeniavirus, Minkenteritisvirus), вызывающих парвовирусный энтерит собак и норок и панлейкопению кошек, в мазках со слизистой прямой кишки и фекалиях восприимчивых животных методом полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Тест-система предназначена для выявления ДНК парвовирусов (Canineparvovirus, Felinepanleukopeniavirus, Minkenteritisvirus), вызывающих парвовирусный энтерит собак и норок и панлейкопению кошек, в мазках со слизистой прямой кишки и фекалиях восприимчивых животных методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Материал для исследований должен отбираться от животных не ранее чем через 21 день после иммунизации их живыми вакцинами.

ОТБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

При отборе образцов материала, а также при подготовке проб для исследования необходимо соблюдать меры, предупреждающие обсеменение объектов внешней среды, руководствуясь при этом действующими правилами и инструкциями.

Материал от каждого животного отбирают отдельными инструментами.

Для исследования используют:

- фекалии отбирают в стерильные контейнеры в количестве 5-10 г.

- мазки со слизистой прямой кишки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами. После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл стерильного физиологического раствора или раствора фосфатного буфера. Конец зонда отламывают, с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.

Материалы доставляют в лабораторию в течение суток, сохраняя температуре от 2 °С до 8°С. Допускается хранение материала при температуре не выше -16 °С в течение 7 суток, при температуре не выше -68 °С – в течение длительного времени. Допускается лишь однократное замораживание-оттаивание материала.

«ВИК»

«ВИК» тест система для выявления ДНК провируса иммунодефицита кошек методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

ОТБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

При отборе образцов материала, а также при подготовке проб для исследования необходимо соблюдать меры, предупреждающие обсеменение объектов внешней среды, руководствуясь при этом действующими правилами и инструкциями по данному вопросу.

Материал от каждого животного отбирают отдельными инструментами.

Для исследования используют следующий клинический материал:

Цельную кровь для исследования отбирают в объеме 5 мл в стерильные пробирки с 3 % раствором ЭДТА из расчета 10:1 (или с цитратом Na в стандартной концентрации). Желательно использовать одноразовые системы взятия крови. Закрытую пробирку с кровью несколько раз переворачивают.

Материал доставляют в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя при температуре от 2 до 8°С. Допускается хранение материала при температуре не выше -16°С в течение 7 дней, при температуре не выше минус 68 °С в течение длительного времени. Возможно лишь однократное замораживание-оттаивание материала.

«РИНОВИР»

Тест-система «РИНОВИР» предназначена для выявления ДНК вируса ринотрахеита кошек (Feline herpesvirus) в конъюнктивальных и носоглоточных смывах восприимчивых животных методом ПЦР. Материал для исследований должен отбираться от животных не ранее, чем через 21 день после иммунизации их живыми вакцинами.

ОТБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

При отборе образцов материала, а также при подготовке проб для исследования необходимо соблюдать меры, предупреждающие обсеменение объектов внешней среды, руководствуясь при этом действующими правилами и инструкциями.

Материал от каждого животного отбирают отдельным инструментом.

Для исследования используют смывы с конъюнктивы глаз и поврежденной слизистой носоглотки, а также с изъязвлений слизистой ротовой полости. От одного животного берется один общий образец смывов со всех поврежденных слизистых.

Для взятия материала используют стерильный зонд или аппликатор, который вместе с материалом помещают в пробирку типа «Эппендорф» с 300 мкл стерильного физиологического раствора. Оттянув веко животного, провести зондом по слизистой века по направлению к носу, обмывая глазное яблоко. Тщательно прополоскать зонд в пробирке и аккуратно отжать лишнюю влагу, прижимая наконечник к внутренней стенке пробирки. Процедуру повторить с каждым веком обоих глаз. Поместить зонд в пробирку. Материал со слизистых носоглотки и с изъязвлений ротовой полости собирают тем же образом. Сначала у животного собирают материал из глаз, затем, при наличии поражений, из полости рта и далее из носоглотки в одну и ту же пробирку.

Материалы доставляют в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя при температуре от 2 до 8°С. Допускается хранение материала при t° не выше -16 °С в течение 30 дней.

«ПОЛИЧУМ»

Тест-система «ПОЛИЧУМ» предназначена для выявления вируса чумы плотоядных (Canine Distemper virus) методом ПЦР в мазках и смывах с конъюнктивы глаз, со слизистых носоглотки, прямой кишки, цельной крови, плазме, сыворотке крови и фекалиях восприимчивых животных.

ОТБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

При отборе образцов материала, а также при подготовке проб для исследования необходимо соблюдать меры, предупреждающие заражение людей и обсеменение объектов внешней среды.

Материал от каждого животного отбирают отдельными инструментами.

Для исследования используют следующий клинический материал:

-мазки или смывы (в малом объеме - не более 300 мкл жидкости) конъюнктивы глаз,

-мазки со слизистой носа,

-мазки со слизистой прямой кишки,

-цельная кровь, плазма крови, сыворотка крови,

-фекалии животных.

При длительности заболевания до 5 дней для исследования рекомендуется использовать мазки со слизистых, учитывая клинические симптомы (наличие выделений из носа или наличие диареи). При длительности заболевания более 5 дней рекомендуется одновременное исследование мазков со слизистых, цельной крови (плазмы или сыворотки крови).

Кровь для исследования отбирают в объеме 5 мл в стерильные пробирки с 3% раствором ЭДТА из расчета 10:1 (или с цитратом Na в стандартной концентрации). Желательно использовать одноразовые системы взятия крови. Закрытую пробирку с кровью несколько раз переворачивают. Для получения сыворотки забор крови проводят в пробирку без антикоагулянта.

Мазки со слизистой носа и прямой кишки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами. После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл стерильного физиологического раствора или раствора фосфатного буфера. Конец зонда отламывают или отрезают, с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.

Для приготовления смывов с конъюнктивы использовать стерильные зонды с ватными тампонами и стерильные пробирки объемом 1,5 мл, содержащие 500 мкл стерильного физиологического раствора или раствора фосфатного буфера.

Методика получения смывов:

а) зонд смочить в жидкости и отжать влагу, прислоняя ватный наконечник к внутренней стенке пробирки.

б) оттянув веко животного, провести зондом по слизистой века по направлению к носу, обмывая глазное яблоко.

в) тщательно прополоскать зонд в пробирке.

г) провести процедуры а.-в. последовательно с каждым веком обоих глаз, собирая материал в одну и ту же пробирку.

д) от зонда отломить часть с ватным наконечником (палочка должна быть полностью погружена в пробирку) и поместить его в ту же пробирку, плотно закрыв крышку.

Материал доставляют в лабораторию в день взятия, сохраняя при температуре от 2 до 8°С. Допускается хранение вышеперечисленного материала при температуре не выше -16 °С в течение 1 нед, при температуре не выше -68°С длительно. Допускается только однократное размораживание материала.

«ХЛА-КОМ»

Тест-система «ХЛА-КОМ» для выявления ДНК микроорганизмов семейства Chlamydiaceae в биологическом материале от животных и птиц методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

ОТБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

При отборе образцов материала, а также при подготовке проб для исследования необходимо соблюдать меры, предупреждающие обсеменение объектов внешней среды, руководствуясь при этом действующими правилами и инструкциями.

Материал от каждого животного отбирают отдельными инструментами.

Для исследования используют:

-соскобы слизистых оболочек (конъюнктивы, урогенитального тракта, а у птиц - клоаки),

-помет птиц,

-паренхиматозные органы павших или вынужденно убитых животных и птиц, кусочки плодовых оболочек, паренхиматозные органы и перевязанный с двух сторон сычуг аборт-плодов,

-сперму замороженную (или пробы эякулята),

-мочу от производителей, подозрительных по заболеванию.

Жидкости для исследования отбирают в объеме 20 мл. Из тканей и органов вырезают кусочки размером 1x1x1 см (при невозможности толщина кусочков может быть меньше). Материалы доставляют в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя при температуре от 2°С до 8 °С. Допускается хранение материала при температуре не выше -16°С в течение 30 дней. Пробы мочи нужно доставлять в тот же день.

Пробы паренхиматозных органов, плодовых оболочек размером 1х1х1 см тщательно растирают в отдельных стеклянных гомогенизаторах, фарфоровых ступках и т.п., добавляют по 1 мл (т.е. примерно равный объем) физиологического раствора и тщательно перемешивают. Смесь отстаивают при комнатной температуре в течение 30 мин, после чего верхнюю фазу переносят в пробирки типа “Эппендорф” и 100 мкл ее используют для экстракции ДНК.

Сперму в объеме не менее 0,5 мл

Соскоб слизистых оболочек разводят в 0,5-1,0 мл физиологического раствора, осаждают на микроцентрифуге при 11-12 тыс об/мин в течение 5-10 мин. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок ресуспендируют в 100 мкл физиологического раствора и используют для экстракции ДНК. Если слизь очень густая (не всасывается в отверстие наконечника дозатора), то к пробе добавляют 1-2 мл раствора Р-меркаптоэтанола (0,1М), перемешивают на вортексе, выдерживают при комнатной температуре 15-20 мин, периодически встряхивая на вортексе, и центрифугируют в вышеуказанном режиме. Осадок ресуспендируют в 100 мкл физиологического раствора и используют для экстракции ДНК.

Пробы помета птиц массой 0,3-0,8 г тщательно суспендируют в 5 мл физиологического раствора (т.е. готовят 5-10 % суспензию). Суспензию центрифугируют на низкооборотной центрифуге при 1,5 тыс об/мин в течение 5 мин и 100 мкл надосадочной жидкости используют для экстракции ДНК.

Похожие работы:

«Список абитуриентов, рекомендованных к зачислению в магистратуру на Географический факультет МГУ имени М.В.Ломоносова№ ФИО НАПРАВЛЕНИЕ1 АВАКОВ АРСЕНИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ ГЕОГРАФИЯ2 АЛЕКСЕЕВА АННА АРТЕМОВНА ГИДРОМЕТЕОРОЛОГИЯ3 АЛОВ ИВАН НИКОЛАЕВИЧ ГЕОГРАФИЯ4 АНИСИМОВ АНТОН ЮРЬЕВ...»

«Олимпиадные задания по биологии 7 класс (2015-2016 уч.год) Часть А Вам предлагаются тестовые задания, требующие выбора только одного ответа. Максимальное количество баллов, которое можно набрать – 30(по 1 баллу за каждое тестовое задание).А1. Перемещение э...»

«УДК [579.841.11+579.842.11]:616-002-092.9-053:612.017.1 Т. И. Коваленко, В. В. Минухин., Е. М. Климова*ИММУНОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ РАЗНОГО ВОЗРАСТА НА МОДЕЛИ ГЕНЕРАЛИЗОВАННОГО ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА. Харьковский национальний медицинский университет (г. Харьков) *Государственное учреждение Институт обще...»

«ДРІС 3Ттенше жадайлар 1.3.1 Ттенше жадайларды жіктелуіТтенше жадайлар негізгі ш белгісі бойынша жіктеледі: Шыу тегі бойынша. Салалы;. Таралу масштабы бойынша.Шыу тегі бойынша:-техногенді-табии сипаттаы болып блінедіТабии сипаттаы ттенше жадайлар:-геофизикалы ауіпті былыстар(зілза...»

«Методические рекомендации по "Экологическим основам природопользования" Методические рекомендации разработаны с целью оказания методической помощи студентам для самостоятельной подготовки по экологическим основам природопользования. Пособие включает в себя краткий курс лекций, вопросы для самоконтроля, методически...»

«Контрольные работы. 9 класс. 1 четверть. Тема "Эволюционное учение". Часть 1.1. Мелкие систематические группы – виды, роды, семейства – в процессе эволюции возникают путем а) ароморфоза, б) идиоадаптации, в) биологического прогресса.2. В чём проявляется творческая роль естественного отбора?а) в возникновении новых...»

«Александр МарковРОЖДЕНИЕ СЛОЖНОСТИЭволюционная биология сегодня: неожиданные открытия и новые вопросы Предисловие Бесконечный лабиринт Эта книга рассказывает о неожиданных и удивительных открытиях, сд...»

«Certification File n° FORMTEXT Бланк заявки на сертификацию идентификационная карточка организации Application form / Company Identity Card1COMPANY DETAILS / РЕКВИЗИТЫ КОМПАНИИНазвание компании:Corporate Name: FORM...»









 
2018 www.el.z-pdf.ru - «Библиотека бесплатных материалов - онлайн документы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 2-3 рабочих дней удалим его.