«Антипролиферативное действие карнозина и его производных на опухолевые клетки нейрального происхождения ...»
2.7. Определение активности каталазыБелок выделяли по методу, описанному выше (Раздел 2.5). Активность каталазы определяли биохимическим путем на спектрофотометре по скорости деградации пероксида водорода по методу, предложенному Aebi и соавторами ADDIN EN.CITE <EndNote><Cite><Author>Aebi</Author><Year>1984</Year><RecNum>138</RecNum><DisplayText>[257]</DisplayText><record><rec-number>138</rec-number><foreign-keys><key app="EN" db-id="w2wfxafe6va9z5eev2l55aa8sxsa599eev2s">138</key></foreign-keys><ref-type name="Journal Article">17</ref-type><contributors><authors><author>Aebi, H.</author></authors></contributors><titles><title>Catalase in vitro</title><secondary-title>Methods Enzymol</secondary-title><alt-title>Methods in enzymology</alt-title></titles><periodical><full-title>Methods Enzymol</full-title><abbr-1>Methods in enzymology</abbr-1></periodical><alt-periodical><full-title>Methods Enzymol</full-title><abbr-1>Methods in enzymology</abbr-1></alt-periodical><pages>121-6</pages><volume>105</volume><edition>1984/01/01</edition><keywords><keyword>Animals</keyword><keyword>Catalase/blood/ metabolism</keyword><keyword>Humans</keyword><keyword>Hydrogen Peroxide/metabolism</keyword><keyword>Kidney/enzymology</keyword><keyword>Kinetics</keyword><keyword>Liver/enzymology</keyword><keyword>Protein Binding</keyword><keyword>Spectrophotometry, Ultraviolet/methods</keyword><keyword>Tissue Distribution</keyword></keywords><dates><year>1984</year></dates><isbn>0076-6879 (Print)
0076-6879 (Linking)</isbn><accession-num>6727660</accession-num><urls></urls><remote-database-provider>NLM</remote-database-provider><language>eng</language></record></Cite></EndNote>[257]. Принцип метода основан на том, что активность каталазы рассчитывается исходя из скорости распада Н2О2. В кювете смешивали известные количества образца и Н2О2 и измеряли оптическую плотность при 240 нМ. Поскольку каталаза разрушает Н2О2, то чем выше была активность каталазы в образце, тем быстрее снижалась концентрация Н2О2 в кювете.
2.8. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в реальном времениКлетки лизировали в тризоле и затем выделяли РНК с помощью набора «Direct-zolTM RNA MiniPrep Kit» согласно инструкции производителя (Zimo Research Corp., США). Комплементарную ДНК (кДНК) синтезировали с помощью набора «High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit» (Applied Biosystems, США). Количественную ПЦР в режиме реального времени (45 циклов) проводили на приборе StepOne™ System (Applied Biosystems, США) с использованием красителя SYBR Green и праймеров. Последовательности праймеров представленных в Таблице 1. Данные анализировали в программе StepOne™ Software v2.2 (Applied Biosystems, США) и Microsoft Excel (Microsoft, США). Результаты представлены в виде относительных значений экспрессии (2Ct), где Ct - значение порогового цикла реакции.
2.9. Статистическая обработка результатовРезультаты измерений, проведенных в 3-5 параллельных пробах, представлены в виде «среднее значение ± стандартное отклонение». Статистическая значимость определяли с помощью одномерного дисперсионного анализа с последующим тестом на наименьшую значимую разность и тестом на взвешенное среднее Тьюки. Данные тесты используются для сравнения и определения разницы между и в пределах групп данных в зависимости от значений среднего и среднеквадратических ошибок для каждой переменной. Гомогенность дисперсии бралась в пределах доверительного интервала в 95%. Результаты со значениями P<0.05 принимались как статистически значимые.
Таблица 1. Последовательности праймеров для ПЦР в реальном времени.
Ген Gene Bank No. Последовательность (5’ 3’) Размер ампликона (п.о.)
CCNB1
(циклин В1) NM_031966.3 Forward: TAGCACTGAAAATTCTGGATAATGGTGA
Reverse: TTGATTTACCATGACTACATTCTTAGCCAG 125
ACTB
(актин В) NM_001101.3 Forward:
TCACCATTGGCAATGAGCGGTT
Reverse:
AGTTTCGTGGATGCCACAGGACT 89
CRNS1
(карнозин-синтетаза) NM_001166222.1
Forward:
AAGCTGGAGGAGGAGGAGAGTGTC
Reverse:
CCTTGCTCAGCAGTGGCCTATCA 154
CNDP1
(карнозиназа) NM_032649 Forward:
CAGCAATCACTTACGGAACCCG
Resverse:
CCGAGAAGAGCAACCAGATCAGC 133
MnСОД NM_000636.2 Forward:
TTGGCCAAGGGAGATGTTAC
Reverse:
AGTCACGTTTGATGGCTTCC 157
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯРАЗДЕЛ 3.
1. Изучение характера действия карнозина и его производных на опухолевые клеткиАнтипролиферативный эффект карнозина на опухолевые и трансформированные клетки был продемонстрирован на ряде различных моделей PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5OYWdhaTwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjE5ODY8L1llYXI+PFJl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ADDIN EN.CITE PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5OYWdhaTwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjE5ODY8L1llYXI+PFJl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ADDIN EN.CITE.DATA [20, 21, 23, 208], однако механизм регуляции клеточной пролиферации с помощью карнозина до сих пор остается до конца не исследованным.
3.1.1. Карнозин снижает количество клеток РС-12 в культуреДля изучения влияния карнозина на пролиферацию опухолевых клеток, была выбрана культура клеток феохромоцитомы крысы РС-12. Клетки обрабатывали карнозином (10 - 50 мМ) в течение 48 ч и затем считали количество клеток в каждой пробе с помощью камеры Горяева.
Рисунок 3.1.
1. Карнозин снижает количество клеток РС-12 в культуре. Клетки обрабатывали карнозином (10 - 50 мМ) в течение 48 ч. (А) Общее количество клеток подсчитывали в камере Горяева. Звездочка обозначает статистически значимое отличие от количества клеток в контроле; n=3, p<0.05. (В) Процент погибших клеток определяли с помощью проточного цитометра по количеству клеток меченных PI. Звездочка обозначает статистически значимое отличие от количества некротических клеток в контроле; n=3, p<0.05.
На Рис. 3.1.1.А. представлены результаты подсчета количества клеток в контроле и пробах обработанных карнозином. Как следует из Рис. 3.1.1.А, инкубация с карнозином приводила к дозо-зависимому снижению количества клеток РС-12. Количество клеток в пробах обработанных 10 мМ карнозина составляло 69% от контроля, 25 мМ – 52%, 50 мМ – 45%. Уменьшение количества клеток происходит в результате их гибели или при замедлении пролиферации. Для того чтобы выяснить, усиливает ли карнозин гибель клеток РС-12 клетки обрабатывали карнозином (10 – 50 мМ) в течение 48 ч, окрашивали маркером погибших клеток, PI, и анализировали интенсивность флуоресценции PI на проточном цитометре. Из Рис. 3.1.1.Б. видно, что достоверных различий в количестве погибших клеток в контроле и пробах, обработанных карнозином, обнаружено не было (Рис. I.1.Б). Исходя из полученных данных, был сделан вывод о том, что снижение общего количества клеток РС-12 под действием карнозина не связано с гибелью клеток и, предположительно, является результатом замедления пролиферации.
3.1.2. Карнозин снижает уровень АФК в клетках культуры РС-121778028575Рисунок 3.1.2. Карнозин снижает уровень АФК в клетках РС-12. Клетки инкубировали с 50 мМ карнозина в течение 0,5 - 48 ч. Уровень АФК измеряли на проточном цитометре по степени окисления DCFH2-DA. Звездочка обозначает статистически значимое отличие от уровня АФК в контроле; n=3, p<0.05.
Быстро пролиферирующие клетки часто характеризуются повышенным содержанием АФК. Понижение уровня АФК в этих клетках с помощью антиоксидантов приводит к снижению скорости пролиферации PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5Hb3N3YW1pPC9BdXRob3I+PFllYXI+MjAwMDwvWWVhcj48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ADDIN EN.CITE PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5Hb3N3YW1pPC9BdXRob3I+PFllYXI+MjAwMDwvWWVhcj48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ADDIN EN.CITE.DATA [26, 66, 149]. Принимая во внимание способность карнозина взаимодействовать с некоторыми видами АФК и снижать их реакционную способность PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5EdXBpbjwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjE5ODQ8L1llYXI+PFJl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ADDIN EN.CITE PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5EdXBpbjwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjE5ODQ8L1llYXI+PFJl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ADDIN EN.CITE.DATA [15-19] можно предположить, что замедление клеточной пролиферации под действием карнозина является результатом его антиоксидантного эффекта. Для того чтобы выяснить, сопровождается ли снижение количества клеток РС-12 под действием карнозина изменениями уровня АФК, клетки РС-12 обрабатывали карнозином (50 мМ) в течение 0,5 - 48 ч. Уровень АФК измеряли на проточном цитометре по степени окисления флуоресцентного красителя DCFH2-DA, результаты измерения представлены на Рис. 3.1.2. Как следует из Рис. 3.1.2, уже через 30 мин инкубации уровень АФК в пробах с карнозином снижался на 50% по сравнению с контролем. Пониженный уровень АФК поддерживался на протяжении 24 ч и возвращался к контрольному уровню через 48 ч. Поскольку снижение уровня АФК по времени предшествовало снижению количества клеток (Рис. 3.1.1.Б), можно предположить, что индуцированное карнозином замедление пролиферации клеток РС-12 является результатом его антиоксидантного эффекта.
3.1.3. Карнозин и его производные индуцируют накопление клеток РС-12 в S и G2/М фазах клеточного циклаПролиферация - это процесс увеличения количества клеток путем деления. Период времени от образования новой клетки до ее деления на две называется клеточным циклом. Клеточный цикл представляет собой совокупность последовательных строго организованных переходов от G1 фазы к S, к G2 и М (митоз). Нарушение прогрессии клеточного цикла ведет к его остановке (блоку) и препятствует дальнейшей пролиферации ADDIN EN.CITE <EndNote><Cite><Author>Grana</Author><Year>1995</Year><RecNum>259</RecNum><DisplayText>[81]</DisplayText><record><rec-number>259</rec-number><foreign-keys><key app="EN" db-id="w2wfxafe6va9z5eev2l55aa8sxsa599eev2s">259</key></foreign-keys><ref-type name="Journal Article">17</ref-type><contributors><authors><author>Grana, X.</author><author>Reddy, E. P.</author></authors></contributors><auth-address>Institute for Cancer Research and Molecular Biology, Temple University School of Medicine, Philadelphia, PA 19140, USA.</auth-address><titles><title>Cell cycle control in mammalian cells: role of cyclins, cyclin dependent kinases (CDKs), growth suppressor genes and cyclin-dependent kinase inhibitors (CKIs)</title><secondary-title>Oncogene</secondary-title><alt-title>Oncogene</alt-title></titles><periodical><full-title>Oncogene</full-title><abbr-1>Oncogene</abbr-1></periodical><alt-periodical><full-title>Oncogene</full-title><abbr-1>Oncogene</abbr-1></alt-periodical><pages>211-9</pages><volume>11</volume><number>2</number><edition>1995/07/20</edition><keywords><keyword>Animals</keyword><keyword>Cell Cycle/ physiology</keyword><keyword>Cyclin-Dependent Kinases/ antagonists & inhibitors/ physiology</keyword><keyword>Cyclins/ physiology</keyword><keyword>Enzyme Inhibitors/ pharmacology</keyword><keyword>Genes, Tumor Suppressor</keyword><keyword>Humans</keyword></keywords><dates><year>1995</year><pub-dates><date>Jul 20</date></pub-dates></dates><isbn>0950-9232 (Print)
0950-9232 (Linking)</isbn><accession-num>7624138</accession-num><urls></urls><remote-database-provider>NLM</remote-database-provider><language>eng</language></record></Cite></EndNote>[81]. Для того чтобы выяснить, связано ли индуцируемое карнозином снижение количества клеток РС-12 с изменениями в прогрессии клеточного цикла, клетки РС-12 обрабатывали карнозином (10 - 50 мМ) в течение 48 ч. По истечении периода инкубации клетки фиксировали, окрашивали PI и с помощью проточного цитометра измеряли количество клеток в G0/G1, S и G2/М фазах по интенсивности флуоресценции PI. На Рис. 3.1.3.А. представлен пример распределения клеток по фазам клеточного цикла в контроле и после инкубации с 50 мМ карнозина. Результаты анализа процентного распределения клеток по фазам клеточного цикла представлены на Рис. 3.1.3.Б.
Рисунок 3.1.
3. Карнозин индуцирует накопление клеток РС-12 в S и G2/М-фазах клеточного цикла. Клетки инкубировали с карнозином (5 - 50 мМ) в течение 48 ч. Содержание ДНК измеряли на проточном цитометре по интенсивности флуоресценции PI. (А) Пример распределения клеток по фазам клеточного цикла в контроле и после инкубации с 50 мМ карнозина. (Б) Процентное распределение клеток по фазам клеточного цикла в контроле и после обработки карнозином. Звездочка обозначает статистически значимое отличие от количества клеток в контроле; n=3, p<0.05.
Как следует из Рис. 3.1.3.Б, карнозин дозо-зависимо увеличивал количество клеток в S и G2/M фазах клеточного цикла. Параллельно происходило снижение количества клеток в G0/G1 фазе. Достоверно отличимый от контроля результат был получен при концентрациях 25 - 50 мМ карнозина. В пробах, обработанных 50 мМ карнозина, число S и G2/M клеток возрастало, соответственно, до 15% и 22%, по сравнению с 12% и 17% в контроле. Количество G0/G1 клеток при этом снижалось до 62% по сравнению с 71% в контроле. Важно отметить, что увеличения количества апоптотических клеток под действием карнозина выявлено не было (отсутствует sub-G1 пик, Рис. 3.1.3.А). Это еще раз подтверждает способность карнозина воздействовать на процессы клеточной пролиферации, а не гибели. Исходя из полученных данных, был сделан вывод о том, что снижение количества клеток РС-12 под действием карнозина происходит в результате замедления прогрессии клеточного цикла и накопления клеток в S и G2/М фазах клеточного цикла.
У карнозина есть несколько природных производных, среди которых наиболее изученными являются ацетил-карнозин (N-ацетил--аланил-L-гистидин) и анзерин (у-амино-бутирил-L-гистидин). Изучение структурно-функциональных взаимосвязей между карнозином и его производными в отношении изменения прогрессии клеточного цикла клеток РС-12 может помочь оценить степень вовлеченности отдельных частей молекулы в исследуемый эффект карнозина. Для того чтобы сравнить, изменения в прогрессии клеточного цикла под действием карнозина и его производных, клетки обрабатывали 50 мМ карнозина, анзерина или ацетил-карнозина в течение 48 ч и анализировали распределение клеток по фазам клеточного цикла согласно содержанию ДНК (Рис. 3.1.4). Как видно из Рис. 3.1.4.А, все исследованные вещества индуцировали накопление клеток в S и G2/М фазах, однако наиболее выраженный эффект демонстрировал анзерин. В пробах обработанных анзерином количество S и G2/М клеток возрастало, соответственно, на 79% и 65%. А количество G0/G1 клеток уменьшалось на 21%. Наименее выраженный эффект демонстрировал ацетил-карнозин. Основываясь на полученных данных, было сделано заключение о том, что метилирование карнозина способствует усилению ингибирующего эффекта на прогрессию клеточного цикла, в то время как ацетилирование карнозина этот эффект ослабляет.
Рисунок 3.1.
4. Анзерин и L-гистидин--аланин замедляют прогрессию клеточного цикла эффективнее, чем карнозин. Клетки РС-12 инкубировали с карнозином и его производными в течение 48 ч. Содержание ДНК измеряли на проточном цитометре по интенсивности флуоресценции PI. Процентное распределение клеток по фазам клеточного цикла в контроле и после инкубации с 50 мМ карнозина, анзерина, ацетил-карнозина (А) или 1 - 10 мМ L-гистидин--аланина (Б). Звездочка обозначает статистически значимое отличие от количества клеток в контроле; n=3, p<0.05.
Синтетическое производное карнозина L-гистидин--аланин, представляющий собой последовательность аминокислот карнозина в обратном порядке (т.н. «Карнозин наоборот») эффективнее, чем карнозин индуцировал накопление клеток в S и G2/М фазах клеточного цикла (Рис. 3.1.4.Б). Клетки обрабатывали L-гистидин--аланином в концентрации 1 - 10 мМ в течении 48 ч, затем с помощью проточного цитометра изучали распределение клеток по фазам клеточного цикла согласно содержанию ДНК. Достоверно отличимый от контроля результат наблюдали при концентрации 5 – 10 мМ, то есть в 5 раз ниже, чем для карнозина. Причем, под действием 10 мМ L-гистидин--аланина количество S и G2/М клеток возрастало на 80% и 60% соответственно, что превышало значения, полученные под действием 50 мМ карнозина. В концентрации выше 10 мМ L-гистидин--аланин проявлял токсическое действие, поскольку приводил к гибели более 90% клеток. Таким образом, L-гистидин--аланин замедлял прогрессию клеточного цикла эффективнее, чем карнозин, однако обладал сильным цитотоксическим эффектом.
3.1.4. Изучение воздействия синтетического трипептида пинеалона на клеточный циклПинеалон представляет собой синтетический трипептид (Glu-Asp-Arg), синтезированный на основе анализа экстракта коры головного мозга крупного рогатого скота и проявляющий эффективные антиоксидантные свойства PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5Lb3ppbmE8L0F1dGhvcj48WWVhcj4yMDA4PC9ZZWFyPjxS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ADDIN EN.CITE PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5Lb3ppbmE8L0F1dGhvcj48WWVhcj4yMDA4PC9ZZWFyPjxS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ADDIN EN.CITE.DATA [244-246]. Для изучения эффекта пинеалона на внутриклеточный уровень АФК клетки РС-12 обрабатывали пинеалоном (50 – 500 нМ) в течение 1 ч, а затем индуцировали окислительный стресс добавлением 1 мМ пероксида водорода (Н2О2) на 20 мин. Уровень АФК измеряли с помощью проточного цитометра по степени окисления флуоресцентного красителя DCFH2-DA. Процент погибших клеток определяли по количеству клеток окрашенных PI. Результаты измерения внутриклеточного уровня АФК и процента погибших клеток представлены на Рис. 3.1.5. Как видно из Рис. 3.1.5.А. обработка клеток РС-12 пинеалоном 50 - 500 нМ приводила к снижению внутриклеточного уровня АФК на 40% по сравнению с контролем. Добавление Н2О2 индуцировало рост АФК. Уровень АФК в пробах обработанных 1 мМ Н2О2 в 5 раз превышал значение в контроле. Инкубация клеток с пинеалоном частично препятствовала увеличению уровня АФК под действием Н2О2. Клетки, обработанные пинеалоном (50 - 500 нМ) перед добавлением Н2О2, демонстрировали в 2 раза меньший уровень АФК, чем клетки обработанные только Н2О2. Параллельно с повышением уровня АФК под действием Н2О2 происходило увеличение клеточной гибели. В пробах обработанных Н2О2 количество погибших клеток составляло 42,5% по сравнению с 5% в контроле. Пинеалон (50 – 500 нМ) снижал количество погибших клеток до 32,5 – 20% (Рис. 3.1.5.Б). Таким образом, было продемонстрировано, что пинеалон снижает внутриклеточный уровень АФК, предотвращает развитие окислительного стресса индуцированного действием Н2О2 и защищает клетки РС-12 от гибели.
Рисунок 3.1.
5. Пинеалон снижает уровень АФК в клетках РС-12 и уменьшает клеточную гибель. Клетки обрабатывали пинеалоном (50 – 500 нМ), через 1 час добавляли 1 мМ пероксида водорода (Н2О2), инкубировали 20 мин и анализировали на проточном цитометре. (А) Уровень АФК в контроле и в клетках обработанных пинеалоном и Н2О2 измеренный по степени окисления флуоресцентного красителя DCFH2-DA. (Б) Процент погибших клеток определенный по количеству клеток окрашенных PI. Звездочки обозначают статистически значимое отличие от количества клеток в контроле (*) или в присутствии 1 мМ Н2О2 (**); n=3, p<0.05.
Для того чтобы выяснить, способен ли пинеалон ввиду своих антиоксидантных свойств модифицировать прогрессию клеточного цикла клетки РС-12 обрабатывали пинеалоном (50 - 500 нМ) в течение 24 ч и с помощью проточного цитометра анализировали распределение клеток по фазам клеточного цикла согласно содержанию ДНК.
177806350Рисунок 3.1.6. Пинеалон индуцирует накопление клеток в S и G2/М фазах клеточного цикла. Клетки обрабатывали пинеалоном (50 - 500 нМ) в течение 24 часов. Распределение клеток по фазам клеточного цикла анализировали на проточном цитометре по интенсивности флуоресценции PI. (А) Пример распределения клеток по фазам клеточного цикла в контроле и после обработки пинеалоном. (В) Процентное распределение клеток по фазам клеточного цикла. Звездочка обозначает статистически значимое отличие от количества клеток в контроле; n=3, p<0.05.
На Рис. 3.1.6.А. представлен пример распределения клеток по фазам клеточного цикла в контроле и после обработки пинеалоном 100 нМ. Процентное распределение клеток между G0/G1, S и G2/М фазами в контроле и в пробах обработанных пинеалоном (50 – 500 нМ) показано на Рис. 3.1.6.Б. Как следует из Рис. 3.1.6.Б, пинеалон приводил к дозо-зависимому увеличению количества клеток в S и G2/М фазах и снижению количества клеток в G0/G1 фазе. Распределение в контроле составляло: G0/G1 - 70%, S - 14%, G2/М - 16%. Достоверно отличимый от контроля результат был получен в клетках, обработанных 100 нМ и 500 нМ пинеалона и составлял, соответственно: G0/G1 - 55%, S - 21%, G2/М -24% и G0/G1 - 50%, S - 24%, G2/М - 26%. Существенного влияния пинеалона на количество апоптотических клеток выявлено не было (Рис. 3.1.6.Б). Исходя из полученных, данных был сделано предположение о том, что пинеалон проявляет антиоксидантные свойства в клетках РС-12, а также индуцирует накопление клеток в G2/М фазе клеточного цикла.
Заключение I: Ингибирующее действие карнозина на пролиферацию клеток феохромоцитомы крысы РС-12 сопровождалось модификацией клеточного цикла и накоплением клеток в S и G2/М фазах. Метилирование карнозина приводило к усилению формирования G2-блока, а ацетилирование молекулы этот эффект ослабляло. L-гистидин--аланин (т.н. “карнозин наоборот”) демонстрировал в 5 раз большую эффективность по сравнению с карнозином, однако обладал сильным цитотоксическим эффектом. Синтетический трипептид пениалон также демонстрировал антиоксидантные свойства и индуцировал накопление клеток в S и G2/М фазах. Однако концентрации пинеалона были на несколько порядков ниже, чем для карнозина. Поскольку изменениям в прогрессии клеточного цикла под действием карнозина предшествовало снижение внутриклеточного уровня АФК, было предположено, что существует взаимосвязь между антипролиферативным и антиоксидантным эффектами карнозина.
РАЗДЕЛ 3.2.
Изучение механизма регуляции клеточного цикла под действием карнозинаИсследования механизма антипролиферативного эффекта карнозина были продолжены с использованием культур опухолевых клеток человека, так как именно они представляют собой первостепенную важность и имеют перспективу применения полученных данных на практике.
3.2.1. Карнозин избирательно ингибирует пролиферацию клеток глиобластомыДля изучения характера влияния карнозина на пролиферацию опухолевых клеток человека были выбраны четыре клеточные культуры: карцинома горла и рта (FaDu, Cal27), карцинома молочной железы (MB231), глиобластома (U-118-MG). Клетки всех четырех культур обрабатывали карнозином (40 мМ) и оставляли инкубироваться. Каждые два дня в течение 6 дней клетки подсчитывали и вычисляли время удвоения популяции (Td). Результаты действия карнозина (40 мМ) на пролиферацию исследуемых линий опухолевых клеток представлены на Рис. 3.2.1. Как следует из Рис. 3.2.1. карнозин приводил к увеличению Td всех исследованных клеточных линий. Для интактных клеток Td составляло: 18 ч (FaDu), 16 ч (Cal27), 22 ч (MB231) и 24 ч (U-118-MG). После инкубации с карнозином Td возрастало до: 19 ч (FaDu), 18 ч (Cal27), 26 ч (MB231) и 32 ч (U-118-MG). Увеличение Td под действием карнозина свидетельствовало о замедлении процессов клеточной пролиферации. Наибольшее увеличение Td было отмечено в клетках глиобластомы (Рис. 3.2.1).
209553810Рисунок 3.2.1. Карнозин избирательно ингибирует пролиферацию клеток глиобластомы. Клетки обрабатывали карнозином (40 мМ) Время удвоения популяций (Td) вычисляли по формуле: Td=0.693t/ln(Nt/N0), где t – время (дни), N0 – начальное количество клеток, Nt – количество клеток ко дню t.
Различия в эффективности действия карнозина на опухолевые клетки могут быть связаны с различиями в экспрессии внутриклеточных ферментов, отвечающих за синтез и разрушение карнозина. В организме человека карнозин синтезируется с помощь фермента карнозинсинтетазы из -аланина и L-гистидина с использованием энергии молекулы АТФ PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5IYXJtczwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjE5NTQ8L1llYXI+PFJl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==
ADDIN EN.CITE PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5IYXJtczwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjE5NTQ8L1llYXI+PFJl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==
ADDIN EN.CITE.DATA [6, 258]. Гидролиз карнозина на исходные аминокислоты осуществляется в основном с помощью сывороточной карнозиназы PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5MZW5uZXk8L0F1dGhvcj48WWVhcj4xOTgyPC9ZZWFyPjxS
ZWNOdW0+ODk8L1JlY051bT48RGlzcGxheVRleHQ+WzksIDE5NV08L0Rpc3BsYXlUZXh0PjxyZWNv
cmQ+PHJlYy1udW1iZXI+ODk8L3JlYy1udW1iZXI+PGZvcmVpZ24ta2V5cz48a2V5IGFwcD0iRU4i
IGRiLWlkPSJ3MndmeGFmZTZ2YTl6NWVldjJsNTVhYThzeHNhNTk5ZWV2MnMiPjg5PC9rZXk+PC9m
b3JlaWduLWtleXM+PHJlZi10eXBlIG5hbWU9IkpvdXJuYWwgQXJ0aWNsZSI+MTc8L3JlZi10eXBl
Pjxjb250cmlidXRvcnM+PGF1dGhvcnM+PGF1dGhvcj5MZW5uZXksIEouIEYuPC9hdXRob3I+PGF1
dGhvcj5HZW9yZ2UsIFIuIFAuPC9hdXRob3I+PGF1dGhvcj5XZWlzcywgQS4gTS48L2F1dGhvcj48
YXV0aG9yPkt1Y2VyYSwgQy4gTS48L2F1dGhvcj48YXV0aG9yPkNoYW4sIFAuIFcuPC9hdXRob3I+
PGF1dGhvcj5SaW56bGVyLCBHLiBTLjwvYXV0aG9yPjwvYXV0aG9ycz48L2NvbnRyaWJ1dG9ycz48
dGl0bGVzPjx0aXRsZT5IdW1hbiBzZXJ1bSBjYXJub3NpbmFzZTogY2hhcmFjdGVyaXphdGlvbiwg
ZGlzdGluY3Rpb24gZnJvbSBjZWxsdWxhciBjYXJub3NpbmFzZSwgYW5kIGFjdGl2YXRpb24gYnkg
Y2FkbWl1bTwvdGl0bGU+PHNlY29uZGFyeS10aXRsZT5DbGluIENoaW0gQWN0YTwvc2Vjb25kYXJ5
LXRpdGxlPjxhbHQtdGl0bGU+Q2xpbmljYSBjaGltaWNhIGFjdGE7IGludGVybmF0aW9uYWwgam91
cm5hbCBvZiBjbGluaWNhbCBjaGVtaXN0cnk8L2FsdC10aXRsZT48L3RpdGxlcz48cGVyaW9kaWNh
bD48ZnVsbC10aXRsZT5DbGluIENoaW0gQWN0YTwvZnVsbC10aXRsZT48YWJici0xPkNsaW5pY2Eg
Y2hpbWljYSBhY3RhOyBpbnRlcm5hdGlvbmFsIGpvdXJuYWwgb2YgY2xpbmljYWwgY2hlbWlzdHJ5
PC9hYmJyLTE+PC9wZXJpb2RpY2FsPjxhbHQtcGVyaW9kaWNhbD48ZnVsbC10aXRsZT5DbGluIENo
aW0gQWN0YTwvZnVsbC10aXRsZT48YWJici0xPkNsaW5pY2EgY2hpbWljYSBhY3RhOyBpbnRlcm5h
dGlvbmFsIGpvdXJuYWwgb2YgY2xpbmljYWwgY2hlbWlzdHJ5PC9hYmJyLTE+PC9hbHQtcGVyaW9k
aWNhbD48cGFnZXM+MjIxLTMxPC9wYWdlcz48dm9sdW1lPjEyMzwvdm9sdW1lPjxudW1iZXI+Mzwv
bnVtYmVyPjxlZGl0aW9uPjE5ODIvMDgvMTg8L2VkaXRpb24+PGtleXdvcmRzPjxrZXl3b3JkPkFk
b2xlc2NlbnQ8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+QWR1bHQ8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+QWdlZDwv
a2V5d29yZD48a2V5d29yZD5BZ2luZzwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5DYWRtaXVtLyBibG9vZDwv
a2V5d29yZD48a2V5d29yZD5DYXJub3NpbmUvYW5hbG9ncyAmYW1wOyBkZXJpdmF0aXZlcy9tZXRh
Ym9saXNtPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPkNoaWxkPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPkNoaWxkLCBQ
cmVzY2hvb2w8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+RGlwZXB0aWRhc2VzLyBibG9vZDwva2V5d29yZD48
a2V5d29yZD5Fbnp5bWUgQWN0aXZhdGlvbi9kcnVnIGVmZmVjdHM8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+
SHVtYW5zPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPkluZmFudDwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5Jc29lbGVj
dHJpYyBQb2ludDwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5Jc29lbnp5bWVzLyBibG9vZDwva2V5d29yZD48
a2V5d29yZD5LaW5ldGljczwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5NaWRkbGUgQWdlZDwva2V5d29yZD48
a2V5d29yZD5Nb2xlY3VsYXIgV2VpZ2h0PC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPlN1YnN0cmF0ZSBTcGVj
aWZpY2l0eTwva2V5d29yZD48L2tleXdvcmRzPjxkYXRlcz48eWVhcj4xOTgyPC95ZWFyPjxwdWIt
ZGF0ZXM+PGRhdGU+QXVnIDE4PC9kYXRlPjwvcHViLWRhdGVzPjwvZGF0ZXM+PGlzYm4+MDAwOS04
OTgxIChQcmludCkmI3hEOzAwMDktODk4MSAoTGlua2luZyk8L2lzYm4+PGFjY2Vzc2lvbi1udW0+
NzExNjY0NDwvYWNjZXNzaW9uLW51bT48dXJscz48L3VybHM+PHJlbW90ZS1kYXRhYmFzZS1wcm92
aWRlcj5OTE08L3JlbW90ZS1kYXRhYmFzZS1wcm92aWRlcj48bGFuZ3VhZ2U+ZW5nPC9sYW5ndWFn
ZT48L3JlY29yZD48L0NpdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5UZXVmZWw8L0F1dGhvcj48WWVhcj4yMDAz
PC9ZZWFyPjxSZWNOdW0+OTk8L1JlY051bT48cmVjb3JkPjxyZWMtbnVtYmVyPjk5PC9yZWMtbnVt
YmVyPjxmb3JlaWduLWtleXM+PGtleSBhcHA9IkVOIiBkYi1pZD0idzJ3ZnhhZmU2dmE5ejVlZXYy
bDU1YWE4c3hzYTU5OWVldjJzIj45OTwva2V5PjwvZm9yZWlnbi1rZXlzPjxyZWYtdHlwZSBuYW1l
PSJKb3VybmFsIEFydGljbGUiPjE3PC9yZWYtdHlwZT48Y29udHJpYnV0b3JzPjxhdXRob3JzPjxh
dXRob3I+VGV1ZmVsLCBNLjwvYXV0aG9yPjxhdXRob3I+U2F1ZGVrLCBWLjwvYXV0aG9yPjxhdXRo
b3I+TGVkaWcsIEouIFAuPC9hdXRob3I+PGF1dGhvcj5CZXJuaGFyZHQsIEEuPC9hdXRob3I+PGF1
dGhvcj5Cb3VsYXJhbmQsIFMuPC9hdXRob3I+PGF1dGhvcj5DYXJyZWF1LCBBLjwvYXV0aG9yPjxh
dXRob3I+Q2Fpcm5zLCBOLiBKLjwvYXV0aG9yPjxhdXRob3I+Q2FydGVyLCBDLjwvYXV0aG9yPjxh
dXRob3I+Q293bGV5LCBELiBKLjwvYXV0aG9yPjxhdXRob3I+RHV2ZXJnZXIsIEQuPC9hdXRob3I+
PGF1dGhvcj5HYW56aG9ybiwgQS4gSi48L2F1dGhvcj48YXV0aG9yPkd1ZW5ldCwgQy48L2F1dGhv
cj48YXV0aG9yPkhlaW50emVsbWFubiwgQi48L2F1dGhvcj48YXV0aG9yPkxhdWNoZXIsIFYuPC9h
dXRob3I+PGF1dGhvcj5TYXV2YWdlLCBDLjwvYXV0aG9yPjxhdXRob3I+U21pcm5vdmEsIFQuPC9h
dXRob3I+PC9hdXRob3JzPjwvY29udHJpYnV0b3JzPjxhdXRoLWFkZHJlc3M+RGVwYXJ0bWVudCBv
ZiBFeHBsb3JhdG9yeSBSZXNlYXJjaCwgU2Fub2ZpIFN5bnRoZWxhYm8gUmVjaGVyY2hlLCAxNiBS
dWUgZCZhcG9zO0Fua2FyYSwgRi02NzA4MCBTdHJhc2JvdXJnLCBGcmFuY2UuIG1pY2hhZWwudGV1
ZmVsQHNhbm9maS1zeW50aGVsYWJvLmNvbTwvYXV0aC1hZGRyZXNzPjx0aXRsZXM+PHRpdGxlPlNl
cXVlbmNlIGlkZW50aWZpY2F0aW9uIGFuZCBjaGFyYWN0ZXJpemF0aW9uIG9mIGh1bWFuIGNhcm5v
c2luYXNlIGFuZCBhIGNsb3NlbHkgcmVsYXRlZCBub24tc3BlY2lmaWMgZGlwZXB0aWRhc2U8L3Rp
dGxlPjxzZWNvbmRhcnktdGl0bGU+SiBCaW9sIENoZW08L3NlY29uZGFyeS10aXRsZT48YWx0LXRp
dGxlPlRoZSBKb3VybmFsIG9mIGJpb2xvZ2ljYWwgY2hlbWlzdHJ5PC9hbHQtdGl0bGU+PC90aXRs
ZXM+PHBlcmlvZGljYWw+PGZ1bGwtdGl0bGU+SiBCaW9sIENoZW08L2Z1bGwtdGl0bGU+PGFiYnIt
MT5UaGUgSm91cm5hbCBvZiBiaW9sb2dpY2FsIGNoZW1pc3RyeTwvYWJici0xPjwvcGVyaW9kaWNh
bD48YWx0LXBlcmlvZGljYWw+PGZ1bGwtdGl0bGU+SiBCaW9sIENoZW08L2Z1bGwtdGl0bGU+PGFi
YnItMT5UaGUgSm91cm5hbCBvZiBiaW9sb2dpY2FsIGNoZW1pc3RyeTwvYWJici0xPjwvYWx0LXBl
cmlvZGljYWw+PHBhZ2VzPjY1MjEtMzE8L3BhZ2VzPjx2b2x1bWU+Mjc4PC92b2x1bWU+PG51bWJl
cj44PC9udW1iZXI+PGVkaXRpb24+MjAwMi8xMi8xMTwvZWRpdGlvbj48a2V5d29yZHM+PGtleXdv
cmQ+QW1pbm8gQWNpZCBTZXF1ZW5jZTwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5CYXNlIFNlcXVlbmNlPC9r
ZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPkJyYWluL2Vuenltb2xvZ3k8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+Q2xvbmlu
ZywgTW9sZWN1bGFyPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPkRpcGVwdGlkYXNlcy8gY2hlbWlzdHJ5LyBn
ZW5ldGljcy9tZXRhYm9saXNtPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPkV4cHJlc3NlZCBTZXF1ZW5jZSBU
YWdzPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPkdlbmV0aWMgVmVjdG9yczwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5I
dW1hbnM8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+SW1tdW5vaGlzdG9jaGVtaXN0cnk8L2tleXdvcmQ+PGtl
eXdvcmQ+S2luZXRpY3M8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+TW9sZWN1bGFyIFNlcXVlbmNlIERhdGE8
L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+TXV0YWdlbmVzaXMsIFNpdGUtRGlyZWN0ZWQ8L2tleXdvcmQ+PGtl
eXdvcmQ+UHNldWRvbW9uYXMvZW56eW1vbG9neTwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5SZWNvbWJpbmFu
dCBQcm90ZWlucy9jaGVtaXN0cnk8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+U2VxdWVuY2UgQWxpZ25tZW50
PC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPlNlcXVlbmNlIEhvbW9sb2d5LCBBbWlubyBBY2lkPC9rZXl3b3Jk
PjxrZXl3b3JkPlN1YnN0cmF0ZSBTcGVjaWZpY2l0eTwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5nYW1tYS1H
bHV0YW15bCBIeWRyb2xhc2U8L2tleXdvcmQ+PC9rZXl3b3Jkcz48ZGF0ZXM+PHllYXI+MjAwMzwv
eWVhcj48cHViLWRhdGVzPjxkYXRlPkZlYiAyMTwvZGF0ZT48L3B1Yi1kYXRlcz48L2RhdGVzPjxp
c2JuPjAwMjEtOTI1OCAoUHJpbnQpJiN4RDswMDIxLTkyNTggKExpbmtpbmcpPC9pc2JuPjxhY2Nl
c3Npb24tbnVtPjEyNDczNjc2PC9hY2Nlc3Npb24tbnVtPjx1cmxzPjwvdXJscz48ZWxlY3Ryb25p
Yy1yZXNvdXJjZS1udW0+MTAuMTA3NC9qYmMuTTIwOTc2NDIwMDwvZWxlY3Ryb25pYy1yZXNvdXJj
ZS1udW0+PHJlbW90ZS1kYXRhYmFzZS1wcm92aWRlcj5OTE08L3JlbW90ZS1kYXRhYmFzZS1wcm92
aWRlcj48bGFuZ3VhZ2U+ZW5nPC9sYW5ndWFnZT48L3JlY29yZD48L0NpdGU+PC9FbmROb3RlPn==
ADDIN EN.CITE PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5MZW5uZXk8L0F1dGhvcj48WWVhcj4xOTgyPC9ZZWFyPjxS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==
ADDIN EN.CITE.DATA [9, 195].
Рисунок 3.2.
2. Избирательность действия карнозина сочеталась с различиями в уровнях мРНК карнозин-синтезирующих (А) и карнозин-разрушающих (Б) ферментов в исследуемых клеточных культурах. Результаты ПЦР в реальном времени. Звездочка обозначает статистически значимое отличие от уровня мРНК в клетках U-118-MG; n=3, p<0.05.
На Рис 3.2.
2. представлены результаты измерения экспрессии генов карнозин-синтетазы и карнозиназы в исследуемых клеточных линиях, с помощью метода ПЦР в реальном времени. Из Рис. 3.2.2. видно, что в клетках U-118-MG уровень мРНК карнозин-синтазы был в 3,5 - 5 раз ниже, чем в клетках карцином (Рис. 3.2.2.А), а уровень мРНК карнозиназы, наоборот, был 4 - 6 раз выше (Рис. 3.2.2.Б). На основании этих данных можно предположить, что уровень эндогенного карнозина в клетках глиобластомы изначально ниже, чем в клетках карцином. Изначально низкий уровень карнозина в клетках глиобластомы, вероятно, обуславливает их большую чувствительность к антипролиферативному эффекту карнозина, в то время как высокий уровень карнозина в клетках карцином способствует развитию в них толерантности рост-ингибирующему действию карнозина. Поскольку наиболее выраженный антипролиферативный эффект карнозина был получен на клетках глиобластомы человека U-118-MG, эти клетки были использованы в дальнейших исследованиях.
Для более подробного изучения антипролифативного действия карнозина, клетки U-118-MG инкубировали в среде, в которую добавляли 20-100 мМ карнозина и измеряли Td. На Рис. 3.2.3. представлены результаты подробного анализа влияния карнозина на пролиферацию клеток глиобластомы. Было выяснено, что карнозин приводит к дозо-зависимому увеличению Td клеток U-118-MG, что согласовывалось с полученными ранее данными (Рис. 3.2.1). Td в контроле составляло 35 ч, в присутствии 50 мМ карнозина Td снижалось до 66 ч. Пролиферация была полностью подавлена в пробах обработанных 80 мМ и 100 мМ карнозина (Рис. 3.2.3.А).
Ингибирующий эффект карнозина на пролиферацию клеток U-118-MG был подтвержден результатами измерения способностей клеток формировать колонии, то есть делиться. Результаты анализа выживаемости представлены на Рис. 3.2.3.Б. Из полученных дынных видно, что инкубация клеток глиобластомы с карнозином (50 - 100 мМ) в течение 24 ч приводила к снижению их выживаемости. Выживаемость клеток U-118-MG, обработанных 100 мМ карнозина, снижалась до 60% по сравнению с контролем (Рис. 3.2.3.Б).
Рисунок 3.2.
3. Карнозин дозо-зависимо подавляет пролиферацию клеток глиобластомы. (А) Кривые роста клеток U-118-MG в контроле и при добавлении к среде культивирования 20 – 100 мМ карнозина. Td рассчитывали, как описано на Рис. 3.2.1. Звездочка обозначает статистически значимое отличие от количества клеток в контроле; n=3, p<0.05. (Б) Выживаемость клеток оценивали по способности формировать колонии. Звездочка обозначает статистически значимое отличие от выживаемости в контроле; n=3, p<0.05.
Исходя из полученных данных, был сделан вывод о том, что карнозин оказывает ингибирующее действие на пролиферацию клеток глиобластомы (U-118-MG), карциномы горла и рта (FaDu, Cal27) и молочной железы (MB231). Наиболее выраженный эффект наблюдали в клетках глиобластомы. Избирательность действия карнозина может быть связана с пониженным уровнем экспрессии карнозин-синтетазы и повышенным уровнем экспрессии карнозиназы в клетках глиобластомы по сравнению с клетками карцином.
3.2.2. Карнозин снижает уровень АФК и индуцирует экспрессию MnСОДАФК принимают активное участие в регуляции клеточной пролиферации. Изменения внутриклеточного уровня АФК часто приводит к нарушениям пролиферативных процессов PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5ZYW1hdWNoaTwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjE5OTc8L1llYXI+
PFJlY051bT4zMjI8L1JlY051bT48RGlzcGxheVRleHQ+WzI0LCAyNSwgNjcsIDE3NF08L0Rpc3Bs
YXlUZXh0PjxyZWNvcmQ+PHJlYy1udW1iZXI+MzIyPC9yZWMtbnVtYmVyPjxmb3JlaWduLWtleXM+
PGtleSBhcHA9IkVOIiBkYi1pZD0idzJ3ZnhhZmU2dmE5ejVlZXYybDU1YWE4c3hzYTU5OWVldjJz
Ij4zMjI8L2tleT48L2ZvcmVpZ24ta2V5cz48cmVmLXR5cGUgbmFtZT0iSm91cm5hbCBBcnRpY2xl
Ij4xNzwvcmVmLXR5cGU+PGNvbnRyaWJ1dG9ycz48YXV0aG9ycz48YXV0aG9yPllhbWF1Y2hpLCBB
LjwvYXV0aG9yPjxhdXRob3I+Qmxvb20sIEUuIFQuPC9hdXRob3I+PC9hdXRob3JzPjwvY29udHJp
YnV0b3JzPjxhdXRoLWFkZHJlc3M+Q2VudGVyIGZvciBCaW9sb2dpY3MgRXZhbHVhdGlvbiBhbmQg
UmVzZWFyY2gsIEZvb2QgYW5kIERydWcgQWRtaW5pc3RyYXRpb24sIEJldGhlc2RhLCBNRCAyMDg5
MiwgVVNBLjwvYXV0aC1hZGRyZXNzPjx0aXRsZXM+PHRpdGxlPkNvbnRyb2wgb2YgY2VsbCBjeWNs
ZSBwcm9ncmVzc2lvbiBpbiBodW1hbiBuYXR1cmFsIGtpbGxlciBjZWxscyB0aHJvdWdoIHJlZG94
IHJlZ3VsYXRpb24gb2YgZXhwcmVzc2lvbiBhbmQgcGhvc3Bob3J5bGF0aW9uIG9mIHJldGlub2Js
YXN0b21hIGdlbmUgcHJvZHVjdCBwcm90ZWluPC90aXRsZT48c2Vjb25kYXJ5LXRpdGxlPkJsb29k
PC9zZWNvbmRhcnktdGl0bGU+PGFsdC10aXRsZT5CbG9vZDwvYWx0LXRpdGxlPjwvdGl0bGVzPjxw
ZXJpb2RpY2FsPjxmdWxsLXRpdGxlPkJsb29kPC9mdWxsLXRpdGxlPjxhYmJyLTE+Qmxvb2Q8L2Fi
YnItMT48L3BlcmlvZGljYWw+PGFsdC1wZXJpb2RpY2FsPjxmdWxsLXRpdGxlPkJsb29kPC9mdWxs
LXRpdGxlPjxhYmJyLTE+Qmxvb2Q8L2FiYnItMT48L2FsdC1wZXJpb2RpY2FsPjxwYWdlcz40MDky
LTk8L3BhZ2VzPjx2b2x1bWU+ODk8L3ZvbHVtZT48bnVtYmVyPjExPC9udW1iZXI+PGVkaXRpb24+
MTk5Ny8wNi8wMTwvZWRpdGlvbj48a2V5d29yZHM+PGtleXdvcmQ+Q2VsbCBDeWNsZTwva2V5d29y
ZD48a2V5d29yZD5DZWxsIExpbmU8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+R2VuZSBFeHByZXNzaW9uIFJl
Z3VsYXRpb248L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+SHVtYW5zPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPktpbGxl
ciBDZWxscywgTmF0dXJhbC8gY3l0b2xvZ3kvbWV0YWJvbGlzbTwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5P
eGlkYXRpb24tUmVkdWN0aW9uPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPlBob3NwaG9yeWxhdGlvbjwva2V5
d29yZD48a2V5d29yZD5SZXRpbm9ibGFzdG9tYSBQcm90ZWluLyBtZXRhYm9saXNtPC9rZXl3b3Jk
PjxrZXl3b3JkPlNpZ25hbCBUcmFuc2R1Y3Rpb248L2tleXdvcmQ+PC9rZXl3b3Jkcz48ZGF0ZXM+
PHllYXI+MTk5NzwveWVhcj48cHViLWRhdGVzPjxkYXRlPkp1biAxPC9kYXRlPjwvcHViLWRhdGVz
PjwvZGF0ZXM+PGlzYm4+MDAwNi00OTcxIChQcmludCkmI3hEOzAwMDYtNDk3MSAoTGlua2luZyk8
L2lzYm4+PGFjY2Vzc2lvbi1udW0+OTE2Njg1MDwvYWNjZXNzaW9uLW51bT48dXJscz48L3VybHM+
PHJlbW90ZS1kYXRhYmFzZS1wcm92aWRlcj5OTE08L3JlbW90ZS1kYXRhYmFzZS1wcm92aWRlcj48
bGFuZ3VhZ2U+ZW5nPC9sYW5ndWFnZT48L3JlY29yZD48L0NpdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5NZW5v
bjwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjIwMDc8L1llYXI+PFJlY051bT4zMzwvUmVjTnVtPjxyZWNvcmQ+PHJl
Yy1udW1iZXI+MzM8L3JlYy1udW1iZXI+PGZvcmVpZ24ta2V5cz48a2V5IGFwcD0iRU4iIGRiLWlk
PSJ3MndmeGFmZTZ2YTl6NWVldjJsNTVhYThzeHNhNTk5ZWV2MnMiPjMzPC9rZXk+PC9mb3JlaWdu
LWtleXM+PHJlZi10eXBlIG5hbWU9IkpvdXJuYWwgQXJ0aWNsZSI+MTc8L3JlZi10eXBlPjxjb250
cmlidXRvcnM+PGF1dGhvcnM+PGF1dGhvcj5NZW5vbiwgUy4gRy48L2F1dGhvcj48YXV0aG9yPkdv
c3dhbWksIFAuIEMuPC9hdXRob3I+PC9hdXRob3JzPjwvY29udHJpYnV0b3JzPjxhdXRoLWFkZHJl
c3M+RnJlZSBSYWRpY2FsIGFuZCBSYWRpYXRpb24gQmlvbG9neSBQcm9ncmFtLCBEZXBhcnRtZW50
IG9mIFJhZGlhdGlvbiBPbmNvbG9neSwgVW5pdmVyc2l0eSBvZiBJb3dhLCBJb3dhIENpdHksIElB
IDUyMjQyLCBVU0EuPC9hdXRoLWFkZHJlc3M+PHRpdGxlcz48dGl0bGU+QSByZWRveCBjeWNsZSB3
aXRoaW4gdGhlIGNlbGwgY3ljbGU6IHJpbmcgaW4gdGhlIG9sZCB3aXRoIHRoZSBuZXc8L3RpdGxl
PjxzZWNvbmRhcnktdGl0bGU+T25jb2dlbmU8L3NlY29uZGFyeS10aXRsZT48YWx0LXRpdGxlPk9u
Y29nZW5lPC9hbHQtdGl0bGU+PC90aXRsZXM+PHBlcmlvZGljYWw+PGZ1bGwtdGl0bGU+T25jb2dl
bmU8L2Z1bGwtdGl0bGU+PGFiYnItMT5PbmNvZ2VuZTwvYWJici0xPjwvcGVyaW9kaWNhbD48YWx0
LXBlcmlvZGljYWw+PGZ1bGwtdGl0bGU+T25jb2dlbmU8L2Z1bGwtdGl0bGU+PGFiYnItMT5PbmNv
Z2VuZTwvYWJici0xPjwvYWx0LXBlcmlvZGljYWw+PHBhZ2VzPjExMDEtOTwvcGFnZXM+PHZvbHVt
ZT4yNjwvdm9sdW1lPjxudW1iZXI+ODwvbnVtYmVyPjxlZGl0aW9uPjIwMDYvMDgvMjM8L2VkaXRp
b24+PGtleXdvcmRzPjxrZXl3b3JkPkNlbGwgQ3ljbGU8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+Q2VsbCBD
eWNsZSBQcm90ZWlucy8gbWV0YWJvbGlzbTwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5DZWxsIFByb2xpZmVy
YXRpb248L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+Q2VsbCBUcmFuc2Zvcm1hdGlvbiwgTmVvcGxhc3RpYy8g
bWV0YWJvbGlzbTwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5IdW1hbnM8L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+TWl0
b3Npczwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5PeGlkYXRpb24tUmVkdWN0aW9uPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3
b3JkPlJldGlub2JsYXN0b21hL21ldGFib2xpc208L2tleXdvcmQ+PC9rZXl3b3Jkcz48ZGF0ZXM+
PHllYXI+MjAwNzwveWVhcj48cHViLWRhdGVzPjxkYXRlPkZlYiAyMjwvZGF0ZT48L3B1Yi1kYXRl
cz48L2RhdGVzPjxpc2JuPjA5NTAtOTIzMiAoUHJpbnQpJiN4RDswOTUwLTkyMzIgKExpbmtpbmcp
PC9pc2JuPjxhY2Nlc3Npb24tbnVtPjE2OTI0MjM3PC9hY2Nlc3Npb24tbnVtPjx1cmxzPjwvdXJs
cz48ZWxlY3Ryb25pYy1yZXNvdXJjZS1udW0+MTAuMTAzOC9zai5vbmMuMTIwOTg5NTwvZWxlY3Ry
b25pYy1yZXNvdXJjZS1udW0+PHJlbW90ZS1kYXRhYmFzZS1wcm92aWRlcj5OTE08L3JlbW90ZS1k
YXRhYmFzZS1wcm92aWRlcj48bGFuZ3VhZ2U+ZW5nPC9sYW5ndWFnZT48L3JlY29yZD48L0NpdGU+
PENpdGU+PEF1dGhvcj5CdXJoYW5zPC9BdXRob3I+PFllYXI+MjAwOTwvWWVhcj48UmVjTnVtPjIx
PC9SZWNOdW0+PHJlY29yZD48cmVjLW51bWJlcj4yMTwvcmVjLW51bWJlcj48Zm9yZWlnbi1rZXlz
PjxrZXkgYXBwPSJFTiIgZGItaWQ9Incyd2Z4YWZlNnZhOXo1ZWV2Mmw1NWFhOHN4c2E1OTllZXYy
cyI+MjE8L2tleT48L2ZvcmVpZ24ta2V5cz48cmVmLXR5cGUgbmFtZT0iSm91cm5hbCBBcnRpY2xl
Ij4xNzwvcmVmLXR5cGU+PGNvbnRyaWJ1dG9ycz48YXV0aG9ycz48YXV0aG9yPkJ1cmhhbnMsIFcu
IEMuPC9hdXRob3I+PGF1dGhvcj5IZWludHosIE4uIEguPC9hdXRob3I+PC9hdXRob3JzPjwvY29u
dHJpYnV0b3JzPjxhdXRoLWFkZHJlc3M+RGVwYXJ0bWVudCBvZiBNb2xlY3VsYXIgJmFtcDsgQ2Vs
bHVsYXIgQmlvbG9neSwgUm9zd2VsbCBQYXJrIENhbmNlciBJbnN0aXR1dGUsIEJ1ZmZhbG8sIE5Z
IDE0MjYzLCBVU0EuPC9hdXRoLWFkZHJlc3M+PHRpdGxlcz48dGl0bGU+VGhlIGNlbGwgY3ljbGUg
aXMgYSByZWRveCBjeWNsZTogbGlua2luZyBwaGFzZS1zcGVjaWZpYyB0YXJnZXRzIHRvIGNlbGwg
ZmF0ZTwvdGl0bGU+PHNlY29uZGFyeS10aXRsZT5GcmVlIFJhZGljIEJpb2wgTWVkPC9zZWNvbmRh
cnktdGl0bGU+PGFsdC10aXRsZT5GcmVlIHJhZGljYWwgYmlvbG9neSAmYW1wOyBtZWRpY2luZTwv
YWx0LXRpdGxlPjwvdGl0bGVzPjxwZXJpb2RpY2FsPjxmdWxsLXRpdGxlPkZyZWUgUmFkaWMgQmlv
bCBNZWQ8L2Z1bGwtdGl0bGU+PGFiYnItMT5GcmVlIHJhZGljYWwgYmlvbG9neSAmYW1wOyBtZWRp
Y2luZTwvYWJici0xPjwvcGVyaW9kaWNhbD48YWx0LXBlcmlvZGljYWw+PGZ1bGwtdGl0bGU+RnJl
ZSBSYWRpYyBCaW9sIE1lZDwvZnVsbC10aXRsZT48YWJici0xPkZyZWUgcmFkaWNhbCBiaW9sb2d5
ICZhbXA7IG1lZGljaW5lPC9hYmJyLTE+PC9hbHQtcGVyaW9kaWNhbD48cGFnZXM+MTI4Mi05Mzwv
cGFnZXM+PHZvbHVtZT40Nzwvdm9sdW1lPjxudW1iZXI+OTwvbnVtYmVyPjxlZGl0aW9uPjIwMDkv
MDYvMDM8L2VkaXRpb24+PGtleXdvcmRzPjxrZXl3b3JkPkFuaW1hbHM8L2tleXdvcmQ+PGtleXdv
cmQ+Q2VsbCBDeWNsZS8gcGh5c2lvbG9neTwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5DZWxsIEN5Y2xlIFBy
b3RlaW5zL21ldGFib2xpc208L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+SHVtYW5zPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3
b3JkPk94aWRhdGlvbi1SZWR1Y3Rpb248L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+UmVhY3RpdmUgT3h5Z2Vu
IFNwZWNpZXMvIG1ldGFib2xpc208L2tleXdvcmQ+PGtleXdvcmQ+U2lnbmFsIFRyYW5zZHVjdGlv
bi8gcGh5c2lvbG9neTwva2V5d29yZD48L2tleXdvcmRzPjxkYXRlcz48eWVhcj4yMDA5PC95ZWFy
PjxwdWItZGF0ZXM+PGRhdGU+Tm92IDE8L2RhdGU+PC9wdWItZGF0ZXM+PC9kYXRlcz48aXNibj4x
ODczLTQ1OTYgKEVsZWN0cm9uaWMpJiN4RDswODkxLTU4NDkgKExpbmtpbmcpPC9pc2JuPjxhY2Nl
c3Npb24tbnVtPjE5NDg2OTQxPC9hY2Nlc3Npb24tbnVtPjx1cmxzPjwvdXJscz48ZWxlY3Ryb25p
Yy1yZXNvdXJjZS1udW0+MTAuMTAxNi9qLmZyZWVyYWRiaW9tZWQuMjAwOS4wNS4wMjY8L2VsZWN0
cm9uaWMtcmVzb3VyY2UtbnVtPjxyZW1vdGUtZGF0YWJhc2UtcHJvdmlkZXI+TkxNPC9yZW1vdGUt
ZGF0YWJhc2UtcHJvdmlkZXI+PGxhbmd1YWdlPmVuZzwvbGFuZ3VhZ2U+PC9yZWNvcmQ+PC9DaXRl
PjxDaXRlPjxBdXRob3I+Q2hpdTwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjIwMTI8L1llYXI+PFJlY051bT4yODQ8
L1JlY051bT48cmVjb3JkPjxyZWMtbnVtYmVyPjI4NDwvcmVjLW51bWJlcj48Zm9yZWlnbi1rZXlz
PjxrZXkgYXBwPSJFTiIgZGItaWQ9Incyd2Z4YWZlNnZhOXo1ZWV2Mmw1NWFhOHN4c2E1OTllZXYy
cyI+Mjg0PC9rZXk+PC9mb3JlaWduLWtleXM+PHJlZi10eXBlIG5hbWU9IkpvdXJuYWwgQXJ0aWNs
ZSI+MTc8L3JlZi10eXBlPjxjb250cmlidXRvcnM+PGF1dGhvcnM+PGF1dGhvcj5DaGl1LCBKLjwv
YXV0aG9yPjxhdXRob3I+RGF3ZXMsIEkuIFcuPC9hdXRob3I+PC9hdXRob3JzPjwvY29udHJpYnV0
b3JzPjxhdXRoLWFkZHJlc3M+U2Nob29sIG9mIEJpb3RlY2hub2xvZ3kgYW5kIEJpb21vbGVjdWxh
ciBTY2llbmNlcywgVW5pdmVyc2l0eSBvZiBOZXcgU291dGggV2FsZXMsIFN5ZG5leSwgTlNXIDIw
NTIsIEF1c3RyYWxpYS48L2F1dGgtYWRkcmVzcz48dGl0bGVzPjx0aXRsZT5SZWRveCBjb250cm9s
IG9mIGNlbGwgcHJvbGlmZXJhdGlvbjwvdGl0bGU+PHNlY29uZGFyeS10aXRsZT5UcmVuZHMgQ2Vs
bCBCaW9sPC9zZWNvbmRhcnktdGl0bGU+PGFsdC10aXRsZT5UcmVuZHMgaW4gY2VsbCBiaW9sb2d5
PC9hbHQtdGl0bGU+PC90aXRsZXM+PHBlcmlvZGljYWw+PGZ1bGwtdGl0bGU+VHJlbmRzIENlbGwg
QmlvbDwvZnVsbC10aXRsZT48YWJici0xPlRyZW5kcyBpbiBjZWxsIGJpb2xvZ3k8L2FiYnItMT48
L3BlcmlvZGljYWw+PGFsdC1wZXJpb2RpY2FsPjxmdWxsLXRpdGxlPlRyZW5kcyBDZWxsIEJpb2w8
L2Z1bGwtdGl0bGU+PGFiYnItMT5UcmVuZHMgaW4gY2VsbCBiaW9sb2d5PC9hYmJyLTE+PC9hbHQt
cGVyaW9kaWNhbD48cGFnZXM+NTkyLTYwMTwvcGFnZXM+PHZvbHVtZT4yMjwvdm9sdW1lPjxudW1i
ZXI+MTE8L251bWJlcj48ZWRpdGlvbj4yMDEyLzA5LzA3PC9lZGl0aW9uPjxrZXl3b3Jkcz48a2V5
d29yZD5BbmltYWxzPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPkNlbGwgQ3ljbGU8L2tleXdvcmQ+PGtleXdv
cmQ+Q2VsbCBQcm9saWZlcmF0aW9uPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPkN5dG9raW5lcy9tZXRhYm9s
aXNtPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPkh1bWFuczwva2V5d29yZD48a2V5d29yZD5PeGlkYXRpb24t
UmVkdWN0aW9uPC9rZXl3b3JkPjxrZXl3b3JkPk94aWRhdGl2ZSBTdHJlc3M8L2tleXdvcmQ+PGtl
eXdvcmQ+U2lnbmFsIFRyYW5zZHVjdGlvbjwva2V5d29yZD48L2tleXdvcmRzPjxkYXRlcz48eWVh
cj4yMDEyPC95ZWFyPjxwdWItZGF0ZXM+PGRhdGU+Tm92PC9kYXRlPjwvcHViLWRhdGVzPjwvZGF0
ZXM+PGlzYm4+MTg3OS0zMDg4IChFbGVjdHJvbmljKSYjeEQ7MDk2Mi04OTI0IChMaW5raW5nKTwv
aXNibj48YWNjZXNzaW9uLW51bT4yMjk1MTA3MzwvYWNjZXNzaW9uLW51bT48dXJscz48L3VybHM+
PGVsZWN0cm9uaWMtcmVzb3VyY2UtbnVtPjEwLjEwMTYvai50Y2IuMjAxMi4wOC4wMDI8L2VsZWN0
cm9uaWMtcmVzb3VyY2UtbnVtPjxyZW1vdGUtZGF0YWJhc2UtcHJvdmlkZXI+TkxNPC9yZW1vdGUt
ZGF0YWJhc2UtcHJvdmlkZXI+PGxhbmd1YWdlPmVuZzwvbGFuZ3VhZ2U+PC9yZWNvcmQ+PC9DaXRl
PjwvRW5kTm90ZT4A
ADDIN EN.CITE PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5ZYW1hdWNoaTwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjE5OTc8L1llYXI+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ADDIN EN.CITE.DATA [24, 25, 67, 174]. Карнозин демонстрирует эффективные антиоксидантные свойства, то есть способен влиять на внутриклеточный уровень АФК PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5Cb2xkeXJldjwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjE5ODc8L1llYXI+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ADDIN EN.CITE PEVuZE5vdGU+PENpdGU+PEF1dGhvcj5Cb2xkeXJldjwvQXV0aG9yPjxZZWFyPjE5ODc8L1llYXI+
PFJlY051bT42MTwvUmVjTnVtPjxEaXNwbGF5VGV4dD5bMTUsIDIwNywgMjE1LCAyNTldPC9EaXNw
bGF5VGV4dD48cmVjb3JkPjxyZWMtbnVtYmVyPjYxPC9yZWMtbnVtYmVyPjxmb3JlaWduLWtleXM+
«